抗體將成為您在科研及生產(chǎn)中的得力助手
抗體孵育一抗：
A. 先將需要檢測的抗體準(zhǔn)備好，并決定好它們的稀釋度。
B. 配好5%的Milk（TBST溶解），按要求稀釋好抗體，注意，如需高比例稀釋，最好采用梯度稀釋。
C. 將稀釋好的抗體和膜一起孵育，一般采用RT 1小時，可根據(jù)抗體量和膜上抗原量適當(dāng)延長或縮短時間。
注意：為了便于后面分析結(jié)果，我們一般會選用已確定分子量大小而且純度高的抗體作為marker與一抗同時孵育。
抗體pH的應(yīng)用范圍及選擇：
抗原修復(fù)液的pH非常重要，有效的抗原修復(fù)pH要比修復(fù)液的化學(xué)成分更重要，同樣的修復(fù)液隨著pH的升高染色的強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，但最佳pH范圍為6.0-10.0，目前大家公認(rèn)的最好的抗原修復(fù)液是pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液和pH8.0的EDTA緩沖液，作為通用修復(fù)液堿性pH的修復(fù)液要比酸性的有效，而對固定很長時間舊的存檔組織，酸性pH的修復(fù)液則優(yōu)于堿性的修復(fù)液。
